Veregruppide määramine tsikloonide abil

Reaktiivid on AB0-süsteemi inimese erütrotsüütide A-antigeenide ja B-antigeenide monoklonaalsed antikehad. Preparaadid Tsoliklon Anti-A ja Tsoliklon Anti-B on IgM isotüübi terviklike antikehade soolalahused, stabiliseeritud naatriumasiidiga ja värvilised: kollakasroosas värvuses anti-A fenoolpunasega, sinises anti-B koos trepanasinisega, anti-AB - värvitu... Reagentide tiiter on aglutinatsiooni otseses reaktsioonis tasapinnal (tiitrimine 2% BSA-ga soolalahuses) 1: 32–1: 64, avidiidsus on 5 sekundit. Reaktiive kasutatakse inimese veregruppide tüübistamiseks vastavalt süsteemile AB0 otsese aglutinatsiooni reaktsioonis tasapinnal, katseklaasis või mikroplaadil.

Erütrotsüütide aglutinatsioon ühe reagendi juuresolekul (positiivne reaktsioon) näitab vastava antigeeni olemasolu testveres.

Reaktiivid valatakse hermeetiliselt suletud plastist tilgutipudelitesse mahuga 10 ml.

Lisaks standardsele A-antigeeni tüpiseerimisele Tsoliklon anti-A abil saab antigeensuse või alamrühma selgitamiseks kasutada Tsoliklon anti-A nõrka ja Tsoliklon anti-A1.

Anti-A, anti-B, anti-AB reaktiivid: +2. +8 ° C. Transportimine või ladustamine temperatuuril

temperatuur kuni +25 ° С mitte rohkem kui 30 päeva.

Reagentide puhul on anti-A nõrk, anti-A1: +2. +8 ° C.

3 aastat - anti-A, anti-B, anti-AB reaktiivid

1 aasta - reaktiivide puhul anti-A nõrk, anti-A1

Tsoliklon Anti A (II) 10 ml punaste korkidega

Kass. Nr 20001

  • Funktsionaalne eesmärk
  • Spetsifikatsioonid
  • Dokumentatsioon ja juhised

Hind soovi korral

Toote saate oma ostukorvi lisada, määrates koguse

Tootja: Mediclon

Riik Venemaa

Ühik Ühik: pudel

Pakendi tüüp: pappkarp

Artikkel: 20001

ZOLIKLON ANTI-A tuvastab A1 ja A2 antigeenid usaldusväärselt ning enamikul juhtudel on võimalik neid antigeene aglutinatsiooni tugevuse järgi selgelt eristada (aglutinatsioon AB (IV) rühma A2B proovides on nõrgem ja sageli puudulik). A1 ja A2 antigeenide usaldusväärseks eristamiseks on siiski soovitatav kasutada COLICLON ANTI-A1, mis võimaldab selgelt eristada A1 ja A2 alarühmi, kuna need reageerivad ainult A1 erütrotsüütidega

Funktsionaalne eesmärk

Tsoliklones Anti-A, Anti-B ja Anti-AB on loodud otseste hemaglutinatsioonireaktsioonide abil määrama inimese vererühmad ABO süsteemis ning neid kasutatakse polüklonaalsete immuunseerumite asemel või nendega paralleelselt.

Spetsifikatsioonid

Läbipaistev oranži või punase värvusega kergelt opalestseeruv vedelik.
Naatriumasiidi kasutatakse säilitusainena lõppkontsentratsioonis 0,1%.
Pakend - plastist tilgutiga viaalid 10,0 ml, värvitähisega, 1 tilk on 0,05 - 0,1 ml.
Reagentide tiiter on 1: 32–1: 64 otseses aglutinatsioonireaktsioonis tasapinnal (tiitrimine 2% BSA-ga soolalahuses), avidiidsus on 5 sekundit, peaks andma aglutinatsiooni B (III) ja O (I) rühma erütrotsüütidega. Aglutinatsioon erütrotsüütide A1 ja B tasapinnal hiljemalt 5 sekundi jooksul. pärast segamist.
Säilivusaeg - kaks aastat pimedas kohas temperatuuril +2. 8 ° C. Pärast avamist hoidke pudelit kogu kõlblikkusaja jooksul tihedalt suletuna säilitamistingimustes.
TU 9398-101-51203590-2009
RE nr FSR 2009/06043, kuupäev: 05.11.2009

Dokumentatsioon ja juhised

  • registreerimistunnistus (315 KB)
  • kasutusjuhend (43.5 KB)

Kogu saidil esitatud teave tehniliste omaduste, laos kättesaadavuse, kaupade maksumuse kohta on ainult informatiivsel eesmärgil ja mitte mingil juhul ei ole avalik pakkumine määratud Vene Föderatsiooni tsiviilseadustiku artikli 437 lõike 2 sättega. Kogu üksikasjalikku teavet kaupade, nende kättesaadavuse ja maksumuse kohta saate klienditeeninduse osakonna juhtidelt.

See sait kasutab küpsiseid saidi toimivuse parandamiseks ja analüütilise teabe saamiseks. Lahkarvamuste korral tehke oma brauseris vastavad sätted või lahkuge sellelt saidilt. Veebisaidil www.art-medika.com viibides nõustute meiega privaatsuspoliitika. Taotlusvormi täitmisega kinnitate oma nõusolek töötlemiseks isiklikud andmed.

© 2012-2019 Art-Medica seadmed, reaktiivid, meditsiinitooted kliinilise laboridiagnostika jaoks

Mis on tsolikloonid? Kuidas neid kasutada veregrupi ja Rh-faktori määramiseks

Tsolikloonid - monoklonaalsed antikehad, mis saadi hiirte verest geenitehnoloogia abil ja mida kasutatakse ABO veregrupi ja Rh-faktori määramiseks.

Tsükloneid, erinevalt standardsetest seerumitest, eristatakse kõrge aktiivsuse ja avidsuse (algusaeg, samuti adhesiooni raskusaste (aglutinatsioonireaktsioon)).

Põhilised kolikloonid:

  • Anti-A,
  • Anti-B,
  • AB-vastane,
  • Anti-0 jne.

Rh-faktori ja veregrupid määravad tsoolikloonid.

Tsüklonite abil rühmade määramise tehnika

Selle meetodi abil määratakse laboritingimustes. Õhutemperatuur peaks olema +15 - + 25 kraadi Celsiuse piires. Uuring peaks toimuma piisavalt heas valguses..

Reaktiive tuleb hoida tihedalt suletuna, kuna nende kuivamisel väheneb antikehade aktiivsus märkimisväärselt.

Ärge kasutage helbeid ega häguseid reaktiive. Iga reagent vajab eraldi pipetti.

Analüüs viiakse läbi valgele plaadile või hästi niisutatud pinnaga plaadile. Tsüklonite kõrge aktiivsuse ja avidsuse tõttu on võimalik kasutada rida anti-A ja anti-B reaktiive.

Tahvelarvutis peate tegema pealdised anti-A / anti-B antigeenide nimedega. Edasi langetatakse vastavate kirjutiste alt umbes 0,1 milliliitrit tsooliklooni. Anti-A reaktiiv on kollakasroosa, anti-B - sinine.

Veregruppide määramine

Tilgutage monoklonaalsete antikehade kõrvale üks tilk verd, segage see klaasi või nurga abil reagentidega. Enne tilkapaaride edasist segamist loputage hoolikalt ja pühkige klaas või kepp kuivaks.

Aglutineerimisprotsessi jälgitakse 2,5 minutit, samal ajal kui plaati või tabletti tuleb veidi loksutada. Pärast aja möödumist hinnake tulemust. Tuleb märkida, et aglutinatsiooni jälgimine ei vaja erilisi seadmeid..

Aglutinaadid on isegi palja silmaga üsna selgelt nähtavad, sulades kiiresti kokku ja moodustades suured helbed. Kui adhesiooni pole, saab reaktiivi tilk ühtlase punase värvi..

Tulemuste dekodeerimine

Veregrupi ja tsolikloni võrdlustabel võimaldab teil tulemusi mõista.

Tsoliklon I positiivne I negatiivne II positiivne II negatiivne III positiivne III negatiivne IV positiivne IV negatiivne

Anti-A++++
Anti-B++++
Anti-D++++
  • Kui aglutinatsiooni ei toimu (anti-A ja anti-B-ga), ei sisalda erütrotsüüdid antigeene A ja B. See on I veregrupp.,
  • Kui toimub aglutinatsioon ainult anti-A-ga, sisaldavad erütrotsüüdid ainult antigeeni A, mis iseloomustab II veregruppi,
  • Kui aglutinatsioon ainult anti-B-ga, sisaldavad punalibled antigeeni B, mis iseloomustab III rühma,
  • Kui täheldatakse aglutinatsiooni nii anti-A kui ka B-vastaste tsolikloonidega, sisaldavad erütrotsüüdid mõlemat antigeeni. Autoaglutinatsiooni välistamiseks on vaja läbi viia kontrollprotseduur: sel juhul segatakse 0,1 milliliitrit isotoonilist naatriumkloriidi lahust ja 0,01 milliliitrit uuritavat verd. Kui aglutinatsioonireaktsiooni ei toimu, määratakse IV rühm.

Rh-teguri määramine

Rh-faktori määramiseks kantakse tabletile suur tilk anti-D-suppi, selle kõrval on väike tilk (vähem kui kümme korda) uuritavat verd. Segatakse ja hinnatakse saadud tulemust. Kui aglutinatsioonireaktsioon on alanud, määrab see meetod vere Rh-positiivseks, kui Rh-faktor on negatiivne, aglutinatsiooni ei toimu.

Zolicloni preparaadid

Erütrotest-tsoliclone anti-D on eraldatud.

Neid on kolme tüüpi:

  • Tavapärane anti-D-zolikloon. Lisamisel tekib kaudne aglutinatsioonireaktsioon,
  • Super. Põhjustab otsest aglutinatsiooni,
  • D-vastane segu preparaat, mis sisaldab tavalise ja supertsoolloni anti-D komponente). Nende abiga saate nii veregrupi tuvastada kui ka määrata vere Rh-kuuluvuse.

Erinevus teiste lahuste vahel peitub nimes, kuna nende koostises sisalduvad antikehad - immunoglobuliinid M ja G - annavad võimaluse verd tüüpida ainult AB0 antigeenide järgi. Erinevus seisneb ainult erütrotsüütide adhesiooni mehhanismis (otsene / kaudne aglutinatsioon).

Igal neist ravimitest on oma konkreetsed kasutusalad ja säilivusaeg. Laboratoorses kliinilises diagnostikas on kõige populaarsemad ainult 3 ülaltoodud ravimit (anti-A, anti-B, anti-D).

Kuidas gruppi määrata analüüsitulemuste vale tõlgendamise korral

Mõnikord on võimalik saada ebatäpseid, valesid tulemusi. Näiteks kui verepreparaadile lisamisel muutus nende värv või kui tableti kõigis rakkudes täheldati aglutinatsiooni.

Selliste tulemuste ärahoidmiseks, kui rühma määramine toimub tsoolikonide abil, näeb toimingute algoritm ette teatud reeglid. Kõigepealt peaksite vaatama zolikloonide ringlusperioodi. On vastuvõetamatu kasutada aegunud reaktiive.

Õige protseduuri jaoks on tingimata vaja täita kõiki tingimusi. Ruumis peaks olema temperatuuri reguleerimise ja piisava valgustusega hästi varustatud tööruum. Kui ravimi juhised sisaldavad juhiseid ja vajaliku niiskuse kohta, tuleks ka seda tegurit arvesse võtta..

Suurt tähtsust omab ka tableti puhtus, kuna selle saastumine võib põhjustada uuringus vigu ja selle tulemusel valesid tulemusi..

Kus saab analüüsi teha?

Rühma määratlus zolikloonide järgi on järk-järgult populaarsust kogumas. Kui varem viidi see protseduur läbi ainult erihaiglates (näiteks ainult hematoloogia ja kirurgia osakondades), siis nüüd on see protseduur saadaval peaaegu igas piisavalt varustatud laboris..

Tsoliklooni tehnikat kasutatakse ka polikliinikutes. Seal hõlmab see erinevaid veregrupi ekspressmääramise meetodeid, mis viiakse läbi patsiendi kiireks diagnoosimiseks.

Tasulisi teenuseid pakuvad ka paljud kosmeetika- ja erameditsiini keskused. See protseduur, nagu eespool mainitud, viiakse tasuta läbi terapeudi või raviarsti suunas.

Kui polikliinikus pole võimalik vereanalüüsi taotleda, võib uuringu läbi viia iseseisvalt, kui teil on ravimite komplekt ja spetsiaalne tablett. Siiski tuleb meeles pidada, et usaldusväärsete tulemuste saamiseks tuleb järgida protseduuri tingimusi, eriti see puudutab steriilsust.

Tsoliklon anti a

Anti-A ja B-vastased tsüklonid on mõeldud ABO-süsteemi inimese veregruppide määramiseks standardsete isohem-aglutineerivate seerumite asemel.

ABO-süsteemi veregruppide määramine hõlmab antigeenide A ja B tuvastamist erütrotsüütides standardsete antikehadega ja aglutiniinide tuvastamist uuritava vere seerumis või plasmas standardsete erütrotsüütidega. Antigeenid A ja B määratakse anti-A ja B-vastaste tsüklonite abil. Doonoritel on kohustuslik määrata erütrotsüütides lisaks antigeenidele ka seerumis (plasmas) olevad aglutiniinid, kasutades standardseid erütrotsüüte.

Zolklonaalsete seerumite põhiomadused.

Anti-A ja B-vastased tsüklonid on hübridoomi rakuliinide produkt, mis on saadud hiire antikehi tootvate B-lümfotsüütide liitmisel hiire müeloomirakkudega. Üksikud hübridoomiliinid toodavad ainult ühe klassi immunoglobuliinide homogeenseid antikehi, mis on oma struktuuri ja bioloogilise aktiivsusega täiesti identsed. Ühe klooni rakkude (ühe raku järglased) poolt toodetud antikehad on monoklonaalsed.

Viide. Kloonsed antikehad.

Ühest lümfotsüütist pärineva sama spetsiifilisusega rakukultuur moodustab ühe klooni rakud. Peamine on järgmine: ühest rakust on vaja hankida spetsiifilisi antikehi ja toota neid piiramatus koguses. Raskus seisneb kahe ülesande ületamises: esiteks surevad normaalsed rakud pärast mitut jagamist; teiseks, ainult vähirakud on võimelised lõputult paljunema. Nende kahe kokkusobimatu probleemi lahendamiseks lõid G. Koehler ja K. Milstein 1975. aastal rakuhübriidid ehk hübridoomid. Hübridoomid on normaalsete lümfotsüütide sulandumine toitainekeskkonnas müeloomirakkudega. Selles keskkonnas olevad lümfotsüüdid ei sure ja müeloomipartnerilt saavad nad võimaluse lõputult paljuneda. Seega hübridoomiklann paljuneb ja selle protsessi tulemusena moodustuvad monoklonaalsed antikehad..
Aglutinogeeni A kandvad lümfotsüüdid toodavad spetsiifilist anti-A antikeha; aglutinogeeni B kandvad lümfotsüüdid toodavad spetsiifilist anti-B antikeha.

Monoklonaalseid anti-A ja B-vastaseid antikehi toodavad kaks erinevat hübridoomi. Tsolükloonid anti-A ja anti-B on vastava hübridoomi hiirekandjate lahjendatud astsiidivedelik, mis sisaldab inimese rühma spetsiifiliste antigeenide A või B vastu suunatud M-klassi spetsiifilisi immunoglobuliine (IgM)..
Seega ei sisalda zolokloonid muud spetsiifilist antikeha ja seetõttu ei põhjusta erütrotsüütide mittespetsiifilist polüaglutinatsiooni..

Abiidsus, see tähendab aglutinatsioonireaktsiooni alguse aeg ja raskusaste anti-A ja B-vastastes tsüklonites on suurem kui isohemaglutineerivates ABO seerumites, eriti nõrgalt ekspresseeritud erütrotsüütide antigeenide korral.
Tsüklonid ei ole inimese koerakud, mis välistab nakatumise võimaluse.

Meetod veregruppide määramiseks anti-A ja B-vastaste tsüklonite abil

ABO süsteemi veregruppide määramine tsoolloni reaktiividega viiakse läbi looduslikus veres, mis on stabiliseeritud kasutatud säilitusainete (glugitsiir, tsitroglükofosfaat, hepariin jne) kasutamisega sõrmest võetud veres; säilitusaineteta veres. Kõige selgem aglutinatsioonireaktsioon on täheldatud kõrge erütrotsüütide kontsentratsiooni kasutamisel.

Veregrupi määramine toimub hea valgustusega ruumis temperatuuril + 15 ° kuni + 25 ° C. Reaktiive ei tohiks hoida avatud, kuna nende kuivamisel vähenevad antikehad. Ärge kasutage reaktiive, kui need sisaldavad lahustumatuid helbeid või hägusust. Kasutage iga reagendi jaoks erinevat märgistatud (anti-A või anti-B) pipetti. ABO süsteemi veregrupi määramine toimub tavapäraste meetoditega valgel portselanil või mõnel muul niisutatud pinnaga plaadil.

Zolikoni reaktiivide kõrge aktiivsus ja avidsus võimaldab kasutada ühte anti-A ja B-vastaste reaktiivide sarja. Tableti või plaadi tasapinnale kantakse kaks tilka anti-A ja B-vastaseid tsoolikloone (0,1 ml) vastavate pealdiste all: anti-A või anti-B. Antikehade tilkade kõrvale tilgutatakse uuritavat verd üks väike tilk, umbes 10 korda vähem (0,01 ml). Sõrmelt võetud või ilma säilitusainena võetud veregrupi määramiseks on vaja võtta suur hulk punaseid vereliblesid, see tähendab esimesed tilgad sõrmelt (ilma tugeva pigistamiseta) või vabanenud vere punalibled hüübinud vere settest.

Veregrupi määramisel segatakse antikehad ja veri klaasvarda või klaasiklaasi nurga all, mis enne iga tilga segamist pestakse ja pühitakse kuivaks. Reaktsiooni jälgitakse kergelt õõtsutades kuni 2,5 minutit. Positiivne tulemus veregrupi määramisel avaldub erütrotsüütide aglutinatsioonina (liimimine). Sellisel juhul võib aglutinate näha ilma kohandusteta väikeste punaste agregaatide kujul, mis kiiresti sulavad ja moodustavad suured helbed.
Negatiivse reaktsiooniga veregrupi määramisel jääb tilk ühtlaselt punaseks, aglutininaate selles ei leidu. Aglutinatsioon määratakse tavaliselt esimese 3-5 sekundi jooksul. Hoolimata sellest tuleks tulemusi jälgida vähemalt 2,5 minutit, kuna hiljem võib tekkida aglutinatsioon nõrga tüüpi antigeene A või B sisaldavate erütrotsüütidega.

Veregrupi määramise video

- Naaske jaotise "Erakorraline kirurgia" sisukorra juurde.

Tsüklonid

Tsoliklones on autori nimi esimestele veregruppide tüpiseerimiseks mõeldud monoklonaalsetele antikehadele, mis saadi TsOLIPKist (praegune Venemaa meditsiiniteaduste akadeemia hematoloogiliste uuringute keskus), mis andsid nime vene monoklonaalsetele ravimitele..

Erythrotest tm - Tsoliklonovi kvaliteet on üldiselt tunnustatud ja vastab rahvusvahelistele nõuetele. Kõik määramiseks kasutatavad reaktiivid on läbinud kliinilised uuringud ja neil on registreerimistunnistused. Narkootikumide vabastamisega kaasnevad ranged sise- ja väliskontrollid.

Tootekataloogis saate tutvuda tsüklonite hindadega, tellida teste, lahuseid ja osta vajalikke reaktiive otse veebisaidilt.

Tsolikloonidega anti-A, Anti-B, Anti-AB

Varustus:

1. Erütrotest - anti-A, Anti-B, Anti-AB tsolikloonid

2. Kuivad puhtad pipetid

3. 0,9% naatriumkloriidi isotooniline lahus.

4. Kuiv plaat.

6. Steriilsed marlipallid

8. Klaasvardad

Edusammud:

1. Tilgutage plaadile või plaadile üks suur tilk (0,1 ml) üksikute pipettidega Anti-A, Anti-B ja Anti AB, vastavate siltide all..

2. Tilgutage antikehade tilkade kõrvale üks väike tilk uuritavat verd (0,01–0,03 ml).

3. Sega veri reagendiga.

4. Jälgige Tsoliklones'iga reaktsiooni kulgu visuaalselt, raputades plaati või tabletti ettevaatlikult 3 minutit. Erütrotsüütide aglutineerimine Tsolikloonidega toimub tavaliselt esimese 3-5 sekundi jooksul, kuid vaatlust tuleks teha 3 minutit. erütrotsüütidega aglutinatsiooni hilisema ilmnemise tõttu

5. Reaktsiooni tulemus igas tilgas võib olla positiivne või negatiivne. Positiivset tulemust väljendatakse erütrotsüütide aglutinatsioonis (adhesioonis). Aglutinaadid on palja silmaga nähtavad väikeste punaste täitematerjalidena, mis sulanduvad kiiresti suurteks helvesteks. Negatiivse reaktsiooni korral jääb tilk ühtlaselt punaseks, aglutinaate selles ei tuvastata.

6. Testitava vere aglutinatsioonireaktsiooni tulemuste tõlgendamine Tsoliklonsiga on toodud tabelis.

Reaktsiooni tulemus * koos Tsolikloniga: Anti-A Anti-B Anti-ABTestitud veri kuulub rühma **
---0 (I)
+-+A (II)
-++B (III)
+++AB (IV)

* Plussmärk (+) näitab aglutinatsiooni olemasolu, miinusmärk (-) aglutinatsiooni puudumist.

** Lõpuks tuvastatakse ABO kuuluvus ristmääramise tulemustega: antigeenid A ja B erütrotsüütidel ja isohemaglutiniinid seerumis.

Rh teguri määramine - Rh0 (D) konglutinatsioonireaktsioon, kasutades 10% želatiinilahust.

1. Süstige kahes katseklaasis üks tilk (0,05 ml) uuritud erütrotsüütidest ja 2 tilka 10% želatiini lahust, mis on soojendatud vedelas vees (46 - 48 0 С)..

2. Lisage sellesse torusse 2 tilka reesusevastast seerumit erütrotsüütide ja želatiini segule. Seda seerumit ei lisata teisele katseklaasile; see toimib kontrollina, et välistada testitud erütrotsüütide autoaglutinatsiooni avaldumise võimalus.

3. Lisaks uuritakse kontrollimiseks paralleelselt sama rühma või 0 (I) rühma Rh-positiivseid erütrotsüüte ja Rh-negatiivseid erütrotsüüte, mis on ühes rühmas testverega..

4. Torude sisu segatakse loksutades ja tuubid asetatakse 10 minutiks 46–48 0 С juures olevasse veevanni. või 30 minuti jooksul samal temperatuuril kuiva õhu termostaati.

5. Pärast inkubeerimist lisage katseklaasidesse 5–8 ml. isotooniline naatriumkloriidi lahus, segage sisu torusid 1-2 korda ümber pöörates ja hinnake tulemust.

Tulemuste tõlgendamine.

1. Torusid vaadatakse valguse abil palja silmaga või läbi kahekordse suurendusega luubi. Tulemust tõlgendatakse sõltuvalt erütrotsüütide aglutinatsiooni olemasolust või puudumisest.

2. Kui tulemus on positiivne, on aglutinatsioon läbipaistval, peaaegu värvi muutval vedeliku taustal punaste terade või helvestena hõlpsasti eristatav.

3. Kui tulemus on negatiivne, on katseklaasis nähtav ühtlaselt roosa, kergelt opalestseeruv vedelik..

4. Punaste vereliblede proovid, mis põhjustavad aglutinatsiooni Rh-vastaseerumiga 0 (D) Rh-positiivsete (Rh +) punaste vereliblede proovid, mis ei ole aglutineeritud Rh-vastase seerumiga0(D), - Rh negatiivne (Rh -).

Tulemust peetakse tõeseks tavaliste Rh-positiivsete erütrotsüütidega aglutinatsiooni juuresolekul, Rh-negatiivsete erütrotsüütidega aglutinatsiooni puudumisel ning kontrollitorus oleva aglutinatsiooni (autoaglutinatsiooni) puudumisel, kuhu pandi ainult erütrotsüüdid ja želatiin, kuid seerumivastast ainet ei lisatud. reesus.

Rh teguri Rh määramine0(D) tavalise universaalse reaktiivi kasutamine 33% polüglutsiini lahusega.

1. Katsetorusse süstitakse üks tilk (0,05 ml) verd või erütrotsüüte (säilitusainet ei saa maha pesta), lisatakse 2 tilka standardset universaalset Rh-vastast reagenti ja segatakse erütrotsüüdid reaktiiviga, toru raputades.

2. Katseklaas on peaaegu horisontaalasendisse kallutatud, nii et sisu levib piki selle seinu, ja seejärel pöörake selles asendis aeglaselt ümber horisontaaltelje, viies erütrotsüüdid 3 minutiks reesusevastase reagendiga. See soodustab punaste vereliblede aglutinatsiooni.

3. Reeglina toimub aglutinatsioon 1 minuti jooksul, kuid selle selgema ilmnemise ja stabiilse kompleksi moodustamiseks, samuti pidades silmas viivitatud reaktsiooni võimalust erütrotsüütide nõrgalt väljendunud aglutinatsioonivõimega, tuleks erütrotsüütide kontakti reagendiga teostada vähemalt 3 minutit.

4. 3 minuti pärast. erütrotsüütide mittespetsiifilise agregatsiooni välistamiseks lisage katseklaasi 2-3 ml. isotooniline naatriumkloriidi lahus ja segage sisu (ilma loksutamata!), pöörates toru 2-3 korda ümber.

Kuidas tsüklonid määravad veregrupi

Tsüklonid, hoolimata sellest, kuidas see hämar nimi kõlab, on vaid soolalahuses asetatud monoklonaalsed antikehad. Nimi anti lahenduste väljamõtlejate töökohale - tsoli (Lenini Keskkordu Instituut). Nüüd on see hematoloogia uurimiskeskus.

Tsüklonoonideks nimetatud ravimeid kasutatakse veregrupi ja selle Rh-faktori määramiseks reagentidena. Kolikloone tarnitakse 10 ml plastpudelites. või klaasist (5 ml) vedelal kujul. Viaalid on mugavuse huvides varustatud tilgutitega.

Tsüklonitega veregrupi määramise meetod on lihtne ja täpne. Sel põhjusel kasutatakse seda peamiseks.

Mis on tsoolikloonid

Toimimispõhimõte on kombineerida aglutinogeenidega - keemiliste komponentidega, mis paiknevad teatud erütrotsüütide ülemisel kihil. Sõltuvalt reaktsioonist on võimalik tsüklonitega veregrupp määrata. Aglutinogeeni A olemasolu kompositsioonis näitab anti-A reaktiiv, vastavalt tuvastatakse aglutinogeen B anti-B ainet kasutades.

Pange tähele, et tsolikloonid on üsna mitmekülgne tööriist. Need võimaldavad teil määrata veregrupi nii süsteemis AB0 (kasutades anti-A (punane vedelik) ja anti-B (sinine vedelik) reaktiive) kui ka Rh süsteemis (kasutades anti-D reaktiivi (läbipaistev vedelik))..

Tsüklonitega veregrupi määramine

Tsüklonite abil vere glükoosisisalduse väljaselgitamiseks peate võtma tasase pinnaga toote (tableti), reagendid ise ja kaks tilka verd. Analüüsiks sobib peaaegu iga vedelik, olenemata olekust (säilinud või ilma säilitusaineta) ja proovivõtumeetodist (veenist / sõrmest). Enne pealekandmist tehakse tableti pinnale märgid, mis näitavad, kus ühte või teist tsolicloni kasutatakse.

Pärast pinna ettevalmistamist laseb laborant sellele suure tilga reagenti: tavaliselt anti-A asetatakse vasakule ja anti-B - paremale. Seejärel lisatakse ainele tilk verd, selle suurus peaks olema kümme korda väiksem kui kasutatud vedeliku maht.

Tabletti tuleb õrnalt küljelt küljele raputada, nii et kolikloonid ja veri segunevad, kuid erinevate reaktiividega tilgad ei sulandu omavahel. Mõne minuti pärast võite jälgida vedelike täielikku ühendumist või aglutinatsioonireaktsiooni, kui punased verelibled jäävad kokku ja tekib hüübimine.

Loe ka sellel teemal

Uurimistulemused dekodeeritakse järgmiselt:

  • Aglutinatsiooni puudumine määrab mõlemal juhul esimese rühma.
  • Hüübimine anti-A tsolicloniga kokkupuutel näitab, et veri kuulub teise rühma.
  • Anti-B reaktiiviga tilguti aglutineerimine on kolmanda rühma märk.
  • Mõlema tilga sademed näitavad kuulumist neljandasse rühma..

Viimase reaktsiooni ilmnemisel tuleb andmeid kontrollida korduvate analüüside abil: veretilk segatakse anti-AB tsoliklooniga, aglutinatsiooni ilmnemine kinnitab esimese uuringu tulemust. Teine kontroll välistab mittespetsiifiliste erütrotsüütide adhesiooni, mis võib ilmneda paljude tõsiste haiguste korral.

Teises uuringus lisatakse naatriumkloriidi lahusele verd: kui vedelik kuulub neljandasse rühma, ei tohiks soolalahusele olla positiivset reaktsiooni, vastasel juhul räägime haiguse olemasolust, mis muudab vererakkude omadusi.

Rh-teguri määramine

  • Plaadi pinnale kantakse umbes 0,1 ml reagenti.
  • Läheduses tilgub 0,01 testiverd.
  • Tsoliklon ja uuritud vedelik segatakse spetsiaalse klaasvardaga, iga poole minuti tagant tuleb tabletti loksutada.

Erütrotsüütide kokkukleepumisel ja välja sadenemisel loetakse veri Rh-positiivseks ning aglutinatsiooni puudumisel saab Rh-faktor negatiivse märgi. Tulemust näete, kui erütrotsüütide helbed ilmuvad ilma spetsiaalsete laboriseadmeteta..

Menetluse nüansid

Tsüklonite abil saadud HA ja Rh teguri uuringu täpsus on väga kõrge, kuid mõnikord annab analüüs valesid tulemusi: põhjuseks on inimlik eksimus, kui protseduur viiakse läbi rikkumistega.

Sellise vea riski vähendamiseks peate meeles pidama järgmisi aspekte:

  • Tsükloneid hoitakse külmkapis, optimaalne temperatuur on + 2... +8 kraadi Celsiuse järgi. Kui pudel on pitseerimata, tuleb selle sisu ära kasutada 30 päeva jooksul, kork tuleb tihedalt kinni keerata. Reaktiivid on väliste mõjude suhtes väga tundlikud ja kui säilitamisreegleid ei järgita või pärast kõlblikkusaega, kaotavad nad oma kvaliteedi, mis põhjustab vigu.
  • Uuring viiakse läbi eredas valguses, optimaalne režiim laboris on + 15... +25 kraadi Celsiuse järgi. Kui kliimatingimused ei võimalda säilitada vajalikku õhutemperatuuri, jahutatakse tableti pind enne protseduuri.
  • Oluline on mitte segi ajada, millised kolikloonid tabletil asuvad, selleks on nende asukoht märgitud pinnale markeriga. Kuigi anti-A ja B-vastastel reagentidel on värvierinevus, kaob see pärast vere lisamist praktiliselt.
  • Tuleb jälgida vedelike proportsioone: kui punaseid vereliblesid on liiga palju, on aglutinatsioonireaktsiooni raskem jälgida, vastupidisel juhul (liiga väike maht) adhesioon aeglustub.
  • Ärge laske kahel tilgal ühenduda: isegi servade puudutamine põhjustab analüüsi tulemuste moonutamist. Kui vedelikud siiski ühinevad, viiakse kõigepealt läbi tsikloonide uuring..
  • Labori klaaspulgaga segamisel tuleb iga uuritud tilga jaoks võtta eraldi ese..
  • Vaatlemise minimaalne kestus on 3 minutit, mitmetähenduslike tulemustega uuring kestab kuni 5 minutit.

Tsüklonid

Tsüklonid AB0 kirjutamiseks

Tsüklonid anti-A, anti-B, anti-AB, anti-A1 kasutatakse inimese veregrupi määramiseks erütrotsüütide AB0 antigeenide poolt otseses hemaglutinatsioonireaktsioonis. Anti-A reaktiiv1 võimaldab teil tuvastada rühma antigeenide A variandid: A1, JA2 ja AB: A1B, A2AT.

Anti-A, anti-B ja anti-AB toimeaine on IgM klassi hiire monoklonaalsed antikehad. Zolicloni anti-A alus1 - hiire monoklonaalsed IgM antikehad või taime lektiin (fütohemaglutiniin).

Konkreetsus

  • A-vastane reaktiiv aglutineerib A-antigeene sisaldavaid erütrotsüüte1 ja A2. Reaktsioon on 0 ja B rühma erütrotsüütidega negatiivne.
  • Anti-B annab positiivse reaktsiooni B rühma erütrotsüütidega. Ei aglutineeri 0 ja A rühma vererakke.
  • Tsolikloni anti-AB põhjustab positiivse reaktsiooni A-ga1, JA2, B. Annab negatiivse reaktsiooni 0 rühma erütrotsüütidega.
  • Anti-A1 aglutineerib ainult A-rühma erütrotsüüte1, JA1AT.

Monoklonaalsed reaktiivid on immunokeemiliste omaduste osas täiesti monospetsiifilised ega põhjusta mittespetsiifilist aglutinatsiooni.

AB0 kirjutamise tulemused

Reaktsiooni tulemusGrupi kuuluvusReaktsiooni tulemusGrupi kuuluvus
Anti-AAnti-BAB-vastaneAnti-A1
---Oh (ma)
+-+A (II): A1 (II) või A2 (Ii)+JA1 (Ii)
-JA2 (Ii)
-++B (III)
+++AB (IV): A1B (IV) või A2B (IV)+JA1B (IV)
-JA2B (IV)

(+) - aglutinatsiooni olemasolu;
(-) - aglutinatsioon puudub;
- lõplik järeldus grupi kuuluvuse kohta.

Analüüsitud erütrotsüütide aglutinatsiooni juuresolekul kõigi nelja reagendiga (rühm A)1C) veenduge, et spontaanset autoaglutinatsiooni ei toimuks. Tehke proovi täiendav kontrolluuring 0,9% NaCl lahusega.

Tasandil segage üks tilk (0,01-0,05 ml) verd ühe tilga (0,1 ml) NaCl-ga. Kui aglutinatsiooni pole, liigitage veri A-tüüpi1Punktis (IV). Spontaanse aglutinatsiooni korral korrake tüpiseerimist, kasutades selle proovi pestud erütrotsüüte.

Tsoliklon anti-D Super või anti-D IgM

Tsolikloni anti-D IgM Super'i kasutatakse vere Rh-kuuluvuse määramiseks, tuvastades erütrotsüütide D-antigeeni. Reaktiiv aglutineerib enamiku D-positiivsete vereproovide, välja arvatud D VI osalise antigeeniga erütrotsüüdid.

Anti-D IgM-ga aglutinatsiooni puudumisel viiakse läbi doonori vereproovide selgitav uuring, kasutades anti-D IgG Tsolikloni. Reaktiiv tuvastab nõrkade antigeenide või antigeeni D olemasolu. Anti-D IgG testi retsipientidele ei tehta.

Diagnostika toimeaineks on inimese monoklonaalsed IgM antikehad, mis on toodetud inimese ja hiire heterohübridoomi rakuliinis.

Anti-D IgM spetsiifilisus

Reaktiiv aglutineerib D-positiivseid erütrotsüüte. Ei aglutineeru D-negatiivsete erütrotsüütide ja D VI osalise antigeeniga vererakkudega.

Tsüklon anti-D IgG

Tsolikloni anti-D IgG-d kasutatakse igat tüüpi D-antigeeni tuvastamiseks erütrotsüütides. Võimaldab tuvastada nõrka antigeeni D u ja variante D I - D VII. Leiab kasutamist kaudses antiglobuliini testis ja konglutineerumisreaktsioonis želatiiniga.

  • selgitava diagnostikana D I - D VII antigeeni osaliste variantide tuvastamiseks doonori erütrotsüütide proovides, mis reageerides monoklonaalsete anti-D IgM reagentidega tuvastati esialgu D-negatiivsetena;
  • sõltumatu reagendina igat tüüpi antigeeni D tuvastamiseks: D, D u, D I - D VII.

Diagnostika aktiivseks põhimõtteks on inimese monoklonaalsed IgG antikehad. Toodetud inimese ja hiire heterohübridoomi rakuliini abil.

Zolicloni anti-D IgG spetsiifilisus

Anti-D IgG aglutineerib igat tüüpi D-positiivseid erütrotsüüte: D, D u, D I - D VII. Ei reageeri D-negatiivsete vererakkudega.

Tsoliklon anti a

Reaktiivid on AB0-süsteemi inimese erütrotsüütide A-antigeenide ja B-antigeenide monoklonaalsed antikehad. Preparaadid Tsoliklon Anti-A ja Tsoliklon Anti-B on IgM isotüübi terviklike antikehade soolalahused, stabiliseeritud naatriumasiidiga ja värvilised: kollakasroosas värvuses anti-A fenoolpunasega, sinises anti-B koos trepanasinisega, anti-AB - värvitu... Reagentide tiiter on aglutinatsiooni otseses reaktsioonis tasapinnal (tiitrimine 2% BSA-ga soolalahuses) 1: 32–1: 64, avidiidsus on 5 sekundit. Reaktiive kasutatakse inimese veregruppide tüübistamiseks vastavalt süsteemile AB0 otsese aglutinatsiooni reaktsioonis tasapinnal, katseklaasis või mikroplaadil.

Erütrotsüütide aglutinatsioon ühe reagendi juuresolekul (positiivne reaktsioon) näitab vastava antigeeni olemasolu testveres.

Reaktiivid valatakse hermeetiliselt suletud plastist tilgutipudelitesse mahuga 10 ml.

Lisaks standardsele A-antigeeni tüpiseerimisele Tsoliklon anti-A abil saab antigeensuse või alamrühma selgitamiseks kasutada Tsoliklon anti-A nõrka ja Tsoliklon anti-A1.

Anti-A, anti-B, anti-AB reaktiivid: +2. +8 ° C. Transportimine või ladustamine temperatuuril

temperatuur kuni +25 ° С mitte rohkem kui 30 päeva.

Reagentide puhul on anti-A nõrk, anti-A1: +2. +8 ° C.

3 aastat - anti-A, anti-B, anti-AB reaktiivid

1 aasta - reaktiivide puhul anti-A nõrk, anti-A1

Lisateavet Diabeet